SEPARACIÓN DE PIGMENTOS EN PLANTAS VERDES

INTRODUCCIÓN

Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con diferentes colores: clorofila (verde), carotenos (amarillo claro) y xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones.

FUNDAMENTO

Todas estas sustancias presentes un diferente grado de solubilidad, lo que permite su separación cuando una solución de las mismas asciende por capilaridad a través de una tira de papel poroso dispuesta verticalmente sobre un disolvente orgánico (etanol). Las sustancias más solubles se desplazarán a más velocidad a lo largo de la tira de papel poroso y las menos solubles lo harán más lentamente.

Aparecerán, por tanto, varias bandas de diferentes colores. Estas bandas poseerán diferente grosor, dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolución.

MATERIAL

-        Mortero

-        Tijeras

-        Espinacas u hojas verdes

-        Embudo con papel de filtro

-        Tubo de ensayo en gradilla

-        Etanol

-        Vaso de precipitados o placas de Petri

-        Cuentagotas

-        Tiras de papel de filtro

PROCEDIMIENTO

1.     Colocar en un mortero trozos de hojas de espinacas lavadas, quitando las nerviaciones más gruesas, junto con 10 o 15 cc de etanol.

2.     Triturar sin golpear hasta que el líquido adquiera una coloración verde intensa.

3.     Filtrar en un embudo con papel de filtro y recoger en un tubo de ensayo (es suficiente con 2 o 3 cc de solución de pigmentos.

4.     Colocar en el vaso de precipitados o cápsula de Petri etanol hasta una altura de 1 cm.

5.     Cortar una tira de papel de filtro de unos 8 cm de anchura y 10 cm de altura.

6.     Poner con el cuentagotas en la tira de papel de filtro entre 5 y 10 gotas de la solución de pigmentos, espaciadas en el tiempo y a lo largo de una línea (que puedes marcar con lápiz) a unos 2 cm por encima del borde inferior del papel.

7.     Colocar la tira de papel en el vaso de precipitados o cápsula de Petri con las manchas de pigmentos a 1 cm de la superficie del diluyente (etanol).

8.     Esperar 20 min y observar.

 

CUESTIONES Y RESULTADOS

1.     La solubilidad en alcohol de los pigmentos es, de mayor a menor: carotenos, clorofila y xantofilas. Indica qué pigmento corresponde a cada barra.

2.     ¿Por qué empleamos etanol para extraer la clorofila?

3.     ¿Qué pigmentos son los más abundantes?

4.     Por encima de la clorofila aparece más de una banda, ¿qué significado tiene?

 

              

 

CROMATOGRAFÍA

CROMATOGRAFÍA

OBJETIVO

Separar los pigmentos que forman las diferentes tintas de rotuladores de diferentes colores.

MATERIALES

- Papel de filtro
- Alcohol
- Vaso de precipitados
- Rotuladores de diferentes colores

FUNDAMENTO

 

Las tintas empleadas en los rotuladores son una mezcla que incluye algún disolvente y diferentes pigmentos. Colores como el negro suelen ser mezclas de dos o tres pigmentos diferentes. Para separarlos se puede realizar una cromatografía siguiendo los pasos indicados en el siguiente apartado.

 

PROCEDIMIENTO

 

1. Preparamos las tintas
2. Cortamos tiras de papel de filtro de 0`5 cm de ancho por 8 cm de largo. Realizamos una pequeña marca de rotulador a 1cm de los extremos de cada tira. En el otro extremo identificamos con lápiz el color de la tinta empleada.
3. Separamos los pigmentos
4. Situamos las tiras dentro de un vaso pequeño que contenga alcohol. Debemos tener cuidado que el alcohol no llegue a mojar directamente la marca de tinta porque disolvería los componentes y tendríamos que empezar de nuevo.
5. Observamos como el alcohol va subiendo por el papel y cuando alcanza la mancha disuelve la tinta y sigue subiendo.

Como cada pigmento se mueve a una velocidad diferente por el papel debido a las características de las partículas que los forman, la mancha se va descomponiendo. Si comparamos las diferentes tintas del mismo color, quizás observemos que no todas usan las mismas sustancias.